二手熒光定量PCR儀是一種可以實時檢測核酸擴增的技術✘☁☁☁✘，在PCR反應體系中加入熒光基團✘☁☁☁✘，利用熒光訊號的變化對PCR過程進行實時監控✘☁☁☁✘，以此實現對初始模板的定量分析✘↟。無需參比染料✘☁☁☁✘，無需定期校準✘☁☁☁✘，採用歸一化演算法✘☁☁☁✘，快速準確直觀的呈現實驗結果✘☁☁☁✘，使用者使用方便簡潔✘↟。我們在做熒光定量PCR時提到的三個名稱·▩•╃│：擴增曲線✘☁☁☁✘，標準曲線✘☁☁☁✘，熔解曲線✘↟。
（1）擴增曲線·▩•╃│：擴增曲線有兩種展現形式✘☁☁☁✘，一種是線性✘☁☁☁✘，一種是對數形式✘↟。我們通常是用CT來推算樣品中樣品的濃度✘↟。CT值越高說明模板濃度越低✘↟。上面也詳細說明了原理✘☁☁☁✘，在這裡就不過多贅述✘↟。
（2）標準曲線·▩•╃│：將已知濃度的樣品（標準品）經過梯度稀釋後分別取樣進行熒光定量PCR✘☁☁☁✘，得到的一系列的Ct值✘☁☁☁✘，用這個Ct值與Log模板數對應可以得到一個相關的曲線✘☁☁☁✘，我們叫標準曲線✘↟。可以用這個標準曲線中的一些引數來判斷這個熒光定量PCR體系的優劣✘↟。
（3）熔解曲線·▩•╃│：Tm值✘☁☁☁✘，MeltingTemperature（解鏈溫度）✘☁☁☁✘，PCR雙鏈產物的退火溫度✘↟。這兩個圖是在熒光定量PCR結束後✘☁☁☁✘，對產物進行逐步升溫時進行的監測✘☁☁☁✘，可以看到在達到其解鏈溫度時✘☁☁☁✘，熒光訊號會有一個忽然的下降✘↟。我們將測得的這個曲線叫做熔解曲線✘↟。理論上如果PCR得到特異性產物則只有一個Tm值✘☁☁☁✘，在溶解曲線上表示只有單峰存在✘↟。如果是多相峰✘☁☁☁✘，那麼可以判斷產物不是單一的✘☁☁☁✘，發生了非特異擴增✘↟。
